USP1如何稳定CDK5蛋白？

科研干货｜USP1如何稳定CDK5？
✨Step1：锁定目标蛋白！
👉实验方法：IP-MS筛选+UbiBrowser预测
🌟亮点发现：从6个候选蛋白中锁定CDK5！敲低USP1后CDK5蛋白减少但mRNA不变，说明USP1在翻译后调控CDK5（图2b-c）
💡#科研小技巧 蛋白水平变化但基因不变？快查翻译后修饰！
🤝Step2：USP1与CDK5 相互作用！
🔍RosettaDock预测互作结构（图2d）
✅实验验证：内外源Co-IP+ GST pulldown三连击（图2e-g）
❗️结论：USP1和CDK5是真互作！
#实验锦囊 互作验证黄金三件套：预测+Co-IP+Pull down
🧩Step3：确定USP1结构域 ！
🔬构建USP1截断突变体（TM1-3）
🔥关键结果：USP1的 C端401-785aa主要负责与CDK5的相互作用 （图2h-i）
⚡️Step4：去泛素化大揭秘！
🔧功能验证：USP1-C90S突变体失活
🔑核心发现：
1️⃣USP1抑制时CDK5降解加速（图2j）
2️⃣MG132蛋白酶体抑制剂可拯救CDK5（图2k-l）
3️⃣USP1敲低显著增加K48型泛素化（图3p-q）
💥重磅结论：USP1特异性清除CDK5的K48泛素化，化身"蛋白稳定侠"！
如有互作机制相关科研问题，欢迎留言探讨。